1 研究區(qū)域概況
2,4-二硝基氯苯,配制1%為致敏濃度,0.1%為 激發(fā)濃度;白洋淀水體(采集自白洋淀王家寨國(guó)控地表水點(diǎn)位);微囊藻毒素(純度95%,瑞士 Alexis公司),配 制成10μg/L 微囊藻毒素水溶 液;白 細(xì) 胞 介 素-1β(IL- 1β,批 號(hào):20190606)、白 細(xì) 胞 介 素-6(IL-6,批 號(hào): 20190104)、腫瘤壞死因子-α(TNF- α,批號(hào):20190104)、 白細(xì)胞介素-17(IL-17,批號(hào):20190916)酶聯(lián)免疫檢測(cè) 試劑盒均由江蘇酶標(biāo)生物科技有限公司生產(chǎn);Trizol(英杰公 司,批 號(hào):15596-026);HiFiScriptKT(批 號(hào): CW2582H)、UltraSYBR Mixture 熒 光 定 量 試 劑 盒 (批 號(hào):CW0957H)、SuperRealPreMixPlus(批 號(hào):FP205) 均購(gòu)自天根生物科技有限公司;全自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國(guó)伯 騰);ABI7500 型熒光定量 PCR 儀(美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng) 公司);BioPhotometer型生物分光光度(德國(guó)艾本德); QL-902 型渦旋振蕩儀(海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司)。
2 結(jié)果
白洋淀水體中含有一定量的易敏物質(zhì),部分游客接 觸水體易造成皮膚過(guò)敏反應(yīng),故本研究建立皮接觸途徑 毒性試驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)水質(zhì)。將36只 SPF 級(jí)昆明小鼠按照 體重隨機(jī)分為空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組和試驗(yàn)組,分別 涂抹生理鹽水、2% 2,4-二硝基氯苯及白洋淀水體。試 驗(yàn)前24h將小鼠腹部?jī)蓚?cè)剃毛來(lái)模仿人類(lèi)皮膚。致敏 接觸:將各受試物涂布于小鼠腹部左側(cè)去毛區(qū),隨即覆 蓋塑料薄膜并固定,給藥6h后洗去,此后第7d和第 14d同法操作。激發(fā)接觸:末次給予受試致敏物后7d, 分別以10倍稀釋后上述致敏物涂于小鼠右側(cè)無(wú)毛區(qū),6 h后將腹部清洗干凈,觀察并記錄小鼠皮膚過(guò)敏反應(yīng)情 況。觀察每次致敏后及激發(fā)接觸后0h、24h、48h和72 h皮膚紅斑、水腫等異常反應(yīng)。
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