測定雪糕中甜蜜素的不確定度評定-VORTEX-5使用

0 引言

不確定度反映了在檢測過程中由誤差導致的實 際值出現(xiàn)偏差的大小程度，是檢測結果準確程度的 一種評價指標和方式。檢測機構在出具試驗報告的 同時出具該檢測項目的不確定度說明，能夠更加確 切地說明該實驗室所具有的檢測能力及技術水平， 因此評定一個檢測項目的不確定度在試驗方法、流 程及試驗結果中扮演著至關重要的角色，在實際檢 測中不容忽視。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

7890B 型氣相色譜儀，安捷倫科技有限公司產(chǎn) 品；LE204E 220 g/0.1 mg 型電子天平，梅特勒 - 托 利多儀器 （上海） 有限公司產(chǎn)品；SK8200HP 型超聲波清洗機，上?？茖С晝x器有限公司產(chǎn)品；VORTEX-5渦旋混合器，海門市其林貝爾產(chǎn)品； LD5- 2B 型離心機，北京京立離心機有限公司產(chǎn)品。

1.1.2 試劑

氫氧化鈉 （分析純），成都市科隆化學品有限公 司提供；正己烷 （色譜純），上海星可高純?nèi)軇┯邢薰咎峁?；氯化鈉 （分析純）、濃硫酸 （分析純）、 硫酸鋅 （分析純）、亞硝酸鈉 （分析純）、亞鐵氰化 鉀 （分析純），國藥集團化學試劑有限公司提供。

1.2 檢測方法

按照國家標準 GB 5009.97—2016 《食品安全國 家標準 食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測定》 第一法 氣 相色譜法檢測方法，稱雪糕樣品 5 g 于 50 mL 離心 管，加水 30 mL，超聲提取 30 min，加入 2 mL 亞鐵 氰化鉀和 2 mL 硫酸鋅溶液，混勻沉淀蛋白后以轉速 3 000 r/min 離心 10 min，過濾，收集濾液并用水定 容至 50 mL，混勻備用。取收集液于 50 mL 離心管 中，冰浴冷卻 5 min 后加入正己烷，混勻后加入 2.5 mL 亞硝酸鈉溶液和 2.5 mL 硫酸水溶液，混勻 后冰浴環(huán)境下衍生 30 min，衍生期間振蕩 3~5 次以 確保衍生完全。衍生后加入適量氯化鈉，混勻后以 轉速 3 000 r/min 離心 10 min，取上清液上機分析。

1.3 標準曲線的配制

取甜 蜜 素 標 準 溶 液 （10.0 mg/mL） 50， 100， 200，500 μL 和甜蜜素標準溶液 （1.0 mg/mL） 100， 200 μL，用超純水定容至 10.0 mL，得到 10，20， 50，100，200，500 μg/mL 的標準工作液，并同樣品 一起衍生。 1.4 儀器條件 色譜柱 HP- 5 （30 m×320 μm×0.25 μm）；進樣 口溫度 230 ℃，分流比 5∶1，升溫程序為初始溫度 55 ℃保持 0 min，以 10 ℃/min 速率升至 90 ℃保持 0.5 min，以 20 ℃/min 速率升至 200 ℃保持 3 min，進 樣量 1 μL，檢測器溫度 260 ℃，色譜柱流量 1 mL/min， 氫氣流量 30 mL/min，空氣流量 330 mL/min。

2 數(shù)學模型建立

結合測定試樣中甜蜜素的計算公式、檢測方法 和實際操作對其不確定度來源分析可知，采用氣相 色譜法測雪糕中甜蜜素含量，影響試驗結果的不確 定度因素主要包括稱取樣品誤差，試樣定容誤差， 標準溶液配制、標準工作曲線配制、標準曲線擬合 引入的誤差，試驗過程中回收率引入誤差。

3 各不確定度分量的分析及計算

標準品在配制過程中，所使用的定容容器和環(huán) 境溫度的變化是引入不確定度的主要來源，具體分 析如下： （1） 標準品配制過程中由定容容器引入的不確 定度。標準品在配制過程中需使用 A 級容量瓶 （10.0 mL） 和 A 級單標線吸量管 （5.0 mL），依據(jù) JJG 196—2006 常用玻璃量具檢定規(guī)程，A 級容量瓶 （10.0 mL） 的最大允許偏差為±0.020 mL，A 級單標 線吸量管（5.0 mL） 最大允許偏差為±0.015 mL，按 照矩形分布原則。
定度。在標品配制過程中，環(huán)境溫度的變化也會 影響標準溶液配制的準確性，從而產(chǎn)生不確定度。 依照 JJG 196—2006 常用玻璃量具檢定規(guī)程，玻璃量 器最佳使用環(huán)境溫度為 20 ℃，而實驗室環(huán)境溫度保 持在 20±5 ℃，在 20±5 ℃溫度范圍下，水的體積 膨脹系數(shù)為 2.1×10- 4，此系數(shù)遠大于玻璃器具的體 積膨脹系數(shù)，因此在實際檢測過程中，環(huán)境溫度變 化對玻璃器具體積的影響可忽略，按照矩形分布原 則。